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高免血清“抗血清”制备方法

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发表于 2022-12-2 23:27:36 | 显示全部楼层 |阅读模式
讯:
  制备高免血清应选用近期有过典型临床表现且明显康复的母猪:体质健壮,无特殊病原体感染,产仔6胎以上,年老、繁殖力下降,无种用价值的淘汰母猪**。
  
  程序1、采血采血应在上午空腹时进行,禁食一夜,可避免血中出现乳糜而获得澄清的血清。将所选择母猪冲洗干净固定于“X”型的保定架上,仰卧保定,将猪尾一端垫高,左胸前口剃毛并用碘酒清洗,用酒精脱碘,等酒精挥发后,准备一空心铜管,一端尖、一端平,长40厘米、直径约1厘米,消毒、烘干后平的一端套硅橡胶管,经消毒的胸前口捅入猪的心脏(不要刺太深,防止完全穿透心脏),放血。2、接血消毒烘干好的容器(大离心瓶或500毫升的注射用生理盐水瓶),将胶管的一头贴住瓶壁,血顺瓶壁流下,装约400毫升~500毫升(离心瓶依照仪器要求)。 3、取血清离心法:400×4离心机按一般血液离心要求进行即可;自然析出:封好瓶口,冷却到室温,放入4℃冰箱过夜,异日取出,取血清,另外装瓶、封口。4、灭活56℃温箱中1.5小时(保证全瓶血清维持在56℃时间至少1小时),自然冷却,加入抗生素(一般是双抗,具体剂量还要看各厂的实际情况),有条件的可对血清进行钴-60辐照消毒。将血清冷冻保存(随解冻随用,大约可以保存12周)。血清的无菌检查血清通过接种琼脂平板,温箱培养看是否有菌落生长,另外,双抗的量加多少可以通过培养情况来确定。
  
  安全性实验通过培养无细菌生长的血清注射小猪约10头(5日龄~10日龄)(腹腔注射),观察一周(每日量体温,观察是否发病)如发病务必确诊发病原因。
  
  肌肉注射:小猪2毫升、中大猪3毫升~5毫升,母猪8毫升。隔5日再注射一次。
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